產(chǎn)品簡介：

本產(chǎn)品是 5×被動裂解液（Passive Lysis Buffer，PLB），專門用于裂解培養(yǎng)細胞，還可用于后續(xù)檢測裂解物中熒光酶活性。

產(chǎn)品特點：

1.可原位對貼壁培養(yǎng)細胞進行快速裂解，無需對貼壁細胞進行刮擦或凍融循環(huán)。

2.螢火蟲熒光素酶的底物熒光素和海腎熒光素酶的底物腔腸素在本產(chǎn)品中的自發(fā)光極其微弱，故使用本產(chǎn)品得到的細胞裂解物可以直接用于后續(xù)的螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶活性測定。

3.跟多個廠家的熒光酶檢測試劑盒兼容。

4.本產(chǎn)品只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成份規(guī)格包裝

5×被動 裂解液30 mL30 mL 本色瓶

使用手冊1 份無

運輸及保存

低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

雙蒸水，PBS 緩沖液

使用方法：

一、對 6 孔板-96 孔板中的培養(yǎng)細胞裂解

1.將5×被動 裂解液用蒸餾水稀釋至1×備用。雖然稀釋后的1×被動裂解液可以在4℃放置1個月，但最好現(xiàn)用現(xiàn)配，用多少配多少。

2.在多孔板中培養(yǎng)的細胞生長到不超過95%的匯合度的時候，吸棄培養(yǎng)基， 小心用自備的PBS緩沖液洗滌細胞一次。

3.離心干甩一次，小心去除多孔板中殘留的液體。

4.每孔加入適量的1×被動裂解液，用移液槍吹打打散細胞。不同多孔板的1×被動裂解液加入量請參考下表：

5.室溫搖床上緩慢搖15分鐘進行細胞裂解。對過度生長的細胞，或少數(shù)沒有過度生長的細胞株，裂解時間可能需要延長1倍。熒光酶在1×被動裂

解液中比較穩(wěn)定，活性并不會降低。

6. 可以直接在多孔板中進行后續(xù)的熒光酶檢測。如果需要長期保存，可以將細胞裂解液吸至1.5 mL離心管，4℃ 12000 rpm（13200 g）離心 10分鐘，將上清液（含熒光酶）轉(zhuǎn)移到新管中。此上清液常溫可以放置6 小時，冰上可以放置16小時，-20℃可以放置1個月，-80℃可以放置半年以上。用此上清液進行后續(xù)實驗時，凍融次數(shù)不要超過3次，否則熒光酶的活性會逐漸降低。

二、對 12 孔板-培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)細胞裂解

1.將5×被動 裂解液用蒸餾水稀釋至1×備用。雖然稀釋后的被動裂解液可以在4℃放置1個月，但最好現(xiàn)用現(xiàn)配，用多少配多少。

2.在多孔板或培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的細胞生長到不超過95%的匯合度的時候，吸棄培養(yǎng)基，小心用自備的PBS洗滌細胞一次。

3.離心干甩一次，小心去除多孔板或培養(yǎng)瓶中殘留的液體。

4.每孔或每個培養(yǎng)瓶中加入適量的1×被動裂解液，用移液槍吹打，打散細胞。不同多孔板或培養(yǎng)瓶的1×被動裂解液加入量請參考下表：

5.用一次性細胞刮子充分刮落貼壁細胞。

6.傾斜多孔板或培養(yǎng)瓶，待裂解物匯集后，再用移液搶充分吹打數(shù)次。

7.將裂解物轉(zhuǎn)移到新的容器中，直接進行后續(xù)測試。如果需要長期保存， 可以將細胞裂解液吸至1.5 mL離心管，4℃ 12000 rpm（13200 g）離心10分鐘，將上清液（含熒光酶）轉(zhuǎn)移到新管中。此上清液常溫可以放置6小時，冰上可以放置16小時，-20℃可以放置1個月，-80℃可以放置半年以上。用此上清液進行后續(xù)實驗時，凍融次數(shù)不要超過3次，否則熒光酶的活性會逐漸降低。

選擇我們的5×被動裂解液，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！