產品簡介：

本產品是在本公司過柱法植物 RNA 提取試劑盒的基礎上經過配方和流程優化得到的無酚無氯仿升級產品，它結合了植物 RNA 提取試劑盒的高效性、快捷性以及無氯仿處理的安全性。

產品特點：

1.免酚和氯仿處理，操作安全可靠。

2.簡單快速，處理一個樣品只需要約十分鐘。

3.RNA 純度更高，平均OD260/280 一般都在 2.0 左右，能夠有效去除大多數植物中的多糖污染。

4.目前已測試過上百種植物。

5.得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、Northern 雜交和 cDNA 合成等實驗。

6.本產品足夠 50 次微量提取，每次可以處理 50-200 mg 植物材料。

7.性價比高于進口的柱式植物 RNA 提取產品。

8.無酚無氯仿植物RNA-提取試劑盒（過柱法）只能用于科研。

產品參數：

成分規格包裝

無酚無氯仿植物 RNA 提取溶液A50 mL60 mL 本色瓶

無酚無氯仿植物 RNA 提取溶液 B50 mL60 mL 本色瓶

離心吸附柱（寬口）30 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶

RNA 洗脫液10 mL10 mL 本色瓶

使用手冊1 份無

運輸及保存

常溫運輸及保存，有效期一年。

自備試劑

無

使用方法：

注意：如果無酚無氯仿植物 RNA 提取溶液 A（以下簡稱溶液 A）低溫下可能會產生沉淀，使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹-底溶解并充分搖勻后再取用。

1.估算組織細胞的用量。每次微量提取一般需要 50-100 mg 植物葉片、或 30-50 mg 植物種子、或 100-200 mg 植物果實。不能多加，否則容易堵柱。無氯仿提取處理的量比常規的加氯仿處理量要少一倍，否則非常容易堵柱，但是否堵柱又取決于植物組織的多糖多酚的濃度。

2.勻漿法裂解樣品:先將新鮮植物組織-剪切成小塊放入 10-15 mL 塑料離心管中， 加入 1 mL 溶液A，然后用勻漿器勻漿 5-20 秒。勻漿時會產生泡沫，但不影響提取效果。

3.或液氮研磨法裂解樣品（適用于復雜，易降解樣品）：取適量新鮮植物組織放入含液氮的研缽中，迅速將組織研磨成粉末后，將粉末轉移到合適的塑料離心管中， 加入 1 mL 溶液 A，立即劇烈振蕩 20 秒，充分混勻。

4.將勻漿物或液氮研磨物轉移至干凈的 1.5mL 塑料離心管中(可以不必轉移非液體的細胞碎片)。有的植物組織(比如果實)含有大量水份，勻漿液會多于 1 mL，轉移時也只取 1 mL。

5.室溫 15000 g 離心 3-5 分鐘，管底沉淀為細胞破碎物。

6.將上清液 (約 1 mL）轉移到另一干凈的 2 mL 塑料離心管中。

7.加入等體積的無酚無氯仿植物 RNA 提取溶液 B，充分顛倒混勻。如果有沉淀產生(對某些植物，屬于正常現象)，不必去掉沉淀，把所有的混合物上柱。

8.將 0.7 mL 的混合溶液轉移到離心吸附柱中，15000 g 室溫離心 3 到 5 分鐘， 棄穿透液。如果離心吸附柱里面有殘留液體沒穿透，可以延長離心時間直到徹-底穿透。

9.將剩下的混合溶液按每次 0.7 mL 的方式轉移到同一離心吸附柱中，每次 15000 g 室溫離心 3-5 分鐘，棄穿透液。

10.由于混合液有 2mL 左右，所以三次轉移即可將混合液全部掛柱。

11.加 0.7 mL 通用洗柱液，室溫 15000 g 離心半分鐘，棄穿透液。如果離心吸附柱里面有殘留液體沒穿透，可以延長離心時間直到徹-底穿透。

12.再加 0.3 mL 通用洗柱液，室溫 15000 g 離心半分鐘，棄穿透液。

13.15000 rpm 室溫離心 10 秒以便去除殘留液體。此步很重要，否則殘留的乙醇會影響 RNA 的使用。

14.將離心吸附柱轉移到 RNase-free 收集管中，加入 50 μL RNA 洗脫液，室溫放置 2 分鐘。

15.15000 g 室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA 樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

16.RNA 完整性的電泳檢測:如果需要做 Northern 雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行 RNA 電泳，因為非變性膠不能分離所有的RNA 分子。

17.RNA 產量產率測定：將 5-10μL RNA 溶于TE 緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測其在 OD260 的光吸收。通過光吸收可以得出 RNA 濃度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL)，進而計算出 RNA 的產量(濃度×體積)和產率(RNA 產量/組織用量)。

18.RNA 純度測定:無污染的總 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之間(具體數值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關)，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質污染，但一般不影響 RT-PCR 等反應。

選擇我們的無酚無氯仿植物RNA-提取試劑盒（過柱法），就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！