產(chǎn)品簡介：

吖啶橙能透過胞膜完整的細胞，嵌入細胞核 DNA，與雙鏈 DNA 結合后發(fā)出綠色熒光，溴化乙錠

(EB)僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核 DNA，發(fā)橘紅色熒光。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察，可見四種細胞形態(tài)：活細胞(VN)，核染色質(zhì)著綠色并呈正常結構；早期凋亡細胞(VA)，核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀；晚期凋亡細胞(NVA)，核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀；非凋亡的死亡細胞(NVN)，核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結構。

使用方法：

AO-EB 雙染試劑盒使用前先根據(jù)用量，將 AO 溶液和 EB 溶液按 1:1 混合成工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

對于貼壁細胞或爬片，去掉培養(yǎng)基，用 PBS 洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細胞，加入新的 PBS； 如果需要觀察全部細胞特性，保留未貼壁細胞，可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后，用 PBS 洗 2 次，除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養(yǎng)基于熒光顯微鏡下觀察即可。

對于懸浮細胞，可直接加入工作液或離心收集細胞后在 PBS 中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后，離心去除工作液，后用 PBS 洗 2 次，除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養(yǎng)基于熒光顯微鏡下觀察即可。

建議用藍光激發(fā)，視野下可以觀察到死細胞呈現(xiàn)紅色，活細胞呈現(xiàn)綠色。

注意事項：

含酚紅培養(yǎng)基對觀察有輕微影響。建議使用無酚紅培養(yǎng)基。

染色液工作濃度和染色時間可根據(jù)具體實驗情況適當調(diào)整，以期達到優(yōu)良效果。

選擇我們的AO-EB 雙染試劑盒，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！