血平板培養基（TSA+5%脫纖維蛋白羊血）

紐約杜博西氏菌培養物和凍干菌種應在 2～8℃保存，勿長期置于室溫。

1、凍干粉復蘇時全部用完，不得保留。

2、參照“開管說明”，用無菌吸管吸取 0.3－0.5ml 的培養液或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養基上（建議不超過   2 個平板），操作完畢盡快置于厭氧環境下恒溫培養；若需要液體培養，制作培養液時，應使用厭氧螺口試管，并利用高純氮氣去除試管和培養液中的氧氣。

3、經過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態，復蘇培養時可能會延遲生長，這時需  較長的培養時間。

4、請將實驗廢棄物高溫高壓滅菌處理后再作丟棄。

5、若您收到的是已復蘇的培養物（非凍干菌），則可以直接用于您的實驗，或根  據需要轉接培養。

活化步驟：

凍干粉首-次活化，將菌粉甩至底部，將尖頭一側用酒精消毒后敲開，取 0.2-0.3ml 溶解液加入至菌種管中，輕輕彈至菌粉混合均勻，用無菌吸頭全部吸出溶解液，全部接種至  2  支斜面上培養。注意真空菌種管一旦敲開里面的凍干粉就必須全部被用掉，留著也沒用。如果有不明白之處，應先與我 中心聯系，避免不必要的損失。

注意事項：

1.微生物菌種應保存于低溫、清潔和干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；

2.紐約杜博西氏菌操作在無菌條件下進行，接種完畢應該滅菌再做丟棄處理； 

3.斜面菌種和穿刺菌種保存時間通常為 3-6 個月，應根據菌種狀況及時結轉；凍干粉保存時間通常是 2-25 年；甘油菌保存時間為 2-5 年。